ଏକ ଆଲୋଷ୍ଟେରିକ୍ ଯୋଡି ହୋଇଥିବା ଅନୁସନ୍ଧାନ ସହିତ ଖୋଲା Hv1 ପ୍ରୋଟନ୍ ଚ୍ୟାନେଲର ଇଣ୍ଟରସୁବୁନିଟ୍ ଇଣ୍ଟରଫେସର ପଚରାଉଚରା |

Nature.com ପରିଦର୍ଶନ କରିଥିବାରୁ ଧନ୍ୟବାଦ | ଆପଣ ବ୍ୟବହାର କରୁଥିବା ବ୍ରାଉଜର୍ ସଂସ୍କରଣରେ CSS ପାଇଁ ସୀମିତ ସମର୍ଥନ ଅଛି | ସର୍ବୋତ୍ତମ ଅଭିଜ୍ଞତା ପାଇଁ, ଆମେ ପରାମର୍ଶ ଦେଉଛୁ ଯେ ଆପଣ ଏକ ଅପଡେଟ୍ ବ୍ରାଉଜର୍ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ (କିମ୍ବା ଇଣ୍ଟରନେଟ୍ ଏକ୍ସପ୍ଲୋରରରେ ସୁସଙ୍ଗତତା ମୋଡ୍ ବନ୍ଦ କରନ୍ତୁ)। ଏହି ସମୟ ମଧ୍ୟରେ, ନିଶ୍ଚିତ କରିବାକୁ ଜାରି ସମର୍ଥନ, ଆମେ ଶ yles ଳୀ ଏବଂ ଜାଭାସ୍କ୍ରିପ୍ଟ ବିନା ସାଇଟ୍ ପ୍ରଦର୍ଶନ କରିବୁ | Hv1 ଭୋଲଟେଜ୍-ଗେଟେଡ୍ ପ୍ରୋଟନ୍ ଚ୍ୟାନେଲ୍ ହେଉଛି ଏକ ଡାଇମେରିକ୍ କମ୍ପ୍ଲେକ୍ସ ଯାହା ଦୁଇଟି ଭୋଲ୍ଟେଜ୍-ସେନ୍ସିଂ ଡୋମେନ୍ (VSDs) କୁ ନେଇ ଗଠିତ, ଯାହାର ପ୍ରତ୍ୟେକଟି ଏକ ଗେଟେଡ୍ ପ୍ରୋଟନ୍ ପର୍ମିଏସନ୍ ପଥ ଧାରଣ କରିଥାଏ | ସାଇଟୋପ୍ଲାଜାମିକ୍ କୋଇଲ୍-କୋଇଲ୍ ଡୋମେନ୍ ଦ୍ୱାରା ଡାଇମେରାଇଜେସନ୍ ନିୟନ୍ତ୍ରିତ | ଉଭୟ VSD ରେ ଖୋଲା ଅବସ୍ଥା ସହଯୋଗୀ ଭାବରେ ଘଟିଥିବାର ଜଣା ପଡିଛି; ତଥାପି, ଅନ୍ତର୍ନିହିତ ଯନ୍ତ୍ରକ about ଶଳ ବିଷୟରେ ଅଳ୍ପ ଜଣା | ଇଣ୍ଟରସୁବୁନିଟ୍ ଇଣ୍ଟରଫେସଗୁଡ଼ିକ ଆଲୋଷ୍ଟେରିକ୍ ପ୍ରକ୍ରିୟାରେ ଏକ ପ୍ରମୁଖ ଭୂମିକା ଗ୍ରହଣ କରିଥାଏ | ତଥାପି, ଏହିପରି ଅନ୍ତରାପୃଷ୍ଠଗୁଡ଼ିକ ଖୋଲା Hv1 ଚ୍ୟାନେଲଗୁଡ଼ିକରେ ଚିହ୍ନଟ ହୋଇନାହିଁ | VSD ର ପ୍ରଥମ ଟ୍ରାନ୍ସମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ଖଣ୍ଡର ସମାପ୍ତି ଏକ ଇଣ୍ଟରସୁବୁନିଟ୍ ଇଣ୍ଟରଫେସ୍ ସୃଷ୍ଟି କରେ ଯାହା ବାଇଣ୍ଡିଂ ସାଇଟ୍ ମଧ୍ୟରେ ଯୋଡି ହେବାର ମଧ୍ୟସ୍ଥତା କରିଥାଏ, ଯେତେବେଳେ କି କୋଇଲ୍-କୋଇଲ୍ ଡୋମେନ୍ ଏହି ପ୍ରକ୍ରିୟାରେ ସିଧାସଳଖ ଜଡିତ ନୁହେଁ | ଆମେ ମଧ୍ୟ ଦୃ strong ପ୍ରମାଣ ପାଇଲୁ ଯେ ଚ୍ୟାନେଲର ପ୍ରୋଟନ୍-ସିଲେକ୍ଟ ଫିଲ୍ଟର୍ ବ୍ଲକର୍-ବାଇଣ୍ଡ ସହଯୋଗକୁ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କରେ । ଭୋଲ୍ଟେଜ୍-ଗେଟେଡ୍ ପ୍ରୋଟନ୍ ଚ୍ୟାନେଲଗୁଡିକ ଫାଇଟୋପ୍ଲ୍ୟାକଟନ୍ ଠାରୁ ଆରମ୍ଭ କରି ମଣିଷ ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ବିଭିନ୍ନ ଜୀବରେ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ଭୂମିକା ଗ୍ରହଣ କରନ୍ତି | ଅଧିକାଂଶ କୋଷରେ, ଏହି ଚ୍ୟାନେଲଗୁଡିକ ପ୍ରୋଟନ୍ ମେମ୍ବ୍ରାନରୁ ପ୍ରୋଟନ୍ ଇଫ୍ଲକ୍ସ ମଧ୍ୟସ୍ଥତା କରନ୍ତି ଏବଂ NADPH ଅକ୍ସିଡେଜ୍ର କାର୍ଯ୍ୟକଳାପକୁ ନିୟନ୍ତ୍ରିତ କରନ୍ତି | ହେଉଛି Hv1, ଯାହାକି HVCN1 ଜିନ୍ ର ଉତ୍ପାଦ 2,3.Hv1 (ଓକେ VSOP) ବି କୋଷ ବିସ୍ତାର 4, ଅନ୍ତର୍ନିହିତ ପ୍ରତିରକ୍ଷା ପ୍ରଣାଳୀ ଦ୍ re ାରା ପ୍ରତିକ୍ରିୟାଶୀଳ ଅମ୍ଳଜାନ ପ୍ରଜାତିର ଉତ୍ପାଦନ 5,6,7,8, ଶୁକ୍ରାଣୁ କୋଷରେ ଏକ ଭୂମିକା ଗ୍ରହଣ କରିବାକୁ ଦର୍ଶାଯାଇଛି | ଗତିପଥ 9 ଏବଂ ବାୟୁପଥ ପୃଷ୍ଠ ତରଳ ପଦାର୍ଥର pH ନିୟନ୍ତ୍ରଣ 10 | ଏହି ଚ୍ୟାନେଲ ଅନେକ ପ୍ରକାରର କର୍କଟ ରୋଗରେ ଜଡିତ ଯେପରିକି ବି-ସେଲ୍ ମାଲିଗାନସି 4,11 ଏବଂ ସ୍ତନ ଏବଂ କଲୋରେକ୍ଟାଲ୍ କର୍କଟ 12,13 ମାଇକ୍ରୋଗ୍ଲିଆ ଦ୍, ାରା, ଏବଂ ଏହାର କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ଇସ୍କେମିକ୍ ଷ୍ଟ୍ରୋକର ମଡେଲରେ ମସ୍ତିଷ୍କର କ୍ଷତି ବ to ାଇଥିବାର ଦେଖାଯାଇଛି | Hv1 ପ୍ରୋଟିନ୍ରେ ଏକ ଭୋଲ୍ଟେଜ୍-ସେନ୍ସିଙ୍ଗ୍ ଡୋମେନ୍ (VSD) ଥାଏ, ଯାହା S1 ରୁ S414 ନାମକ ଚାରୋଟି ଟ୍ରାନ୍ସମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ସେଗମେଣ୍ଟକୁ ନେଇ ଗଠିତ | Ciona gutis15. ଏହି ଅନ୍ୟ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଗୁଡିକରେ, S4 ର C- ଟର୍ମିନାସ୍ ଏକ ଇଫେକ୍ଟର୍ ମଡ୍ୟୁଲ୍, ପୋର ଡୋମେନ୍ କିମ୍ବା ଏନଜାଇମ୍ ସହିତ ସଂଯୁକ୍ତ | Hv1 ରେ, S4 ମେମ୍ବ୍ରାନ୍ର ସାଇଟୋପ୍ଲାଜାମିକ୍ ପାର୍ଶ୍ୱରେ ଅବସ୍ଥିତ କୋଇଲ୍-କୋଇଲ୍ ଡୋମେନ୍ (CCD) ସହିତ ସଂଯୁକ୍ତ | ଚ୍ୟାନେଲ ହେଉଛି ଏକ ଡାଇମେରିକ୍ କମ୍ପ୍ଲେକ୍ସ ଯାହା ଦୁଇଟି VSD ଗୁଡ଼ିକୁ ନେଇ ଗଠିତ, ପ୍ରତ୍ୟେକରେ ଏକ ଗେଟେଡ୍ ପ୍ରୋଟନ୍ ପର୍ମିଏସନ୍ ପଥ 16,17,18 ଧାରଣ କରିଥାଏ | ଏହି ଦୁଇଟି Hv1 ସବନିଟ୍ ମିଳିତ ଭାବରେ 19,20,21,22 ଖୋଲିବାକୁ ମିଳିଲା, ଯାହା ପରାମର୍ଶ ଦେଇଥାଏ ଯେ ଆଲୋଷ୍ଟେରିକ୍ କପଲିଂ ଏବଂ ଆନ୍ତ sub- ସବନିଟ୍ ପାରସ୍ପରିକ କ୍ରିୟା | ଗ୍ୟାଟିଂ ପ୍ରକ୍ରିୟାରେ ଏକ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ଭୂମିକା ଭଲଭାବେ ବୁ understood ିଗଲା | Hv1-CiVSP ଚିମେରିକ୍ ପ୍ରୋଟିନର ସ୍ଫଟିକ୍ ସଂରଚନା ଏହି ଇଣ୍ଟରଫେସ୍ ବିଷୟରେ ସୂଚନା ପ୍ରଦାନ କରେ ନାହିଁ, କାରଣ ସ୍ଫଟିକ୍ ଚ୍ୟାନେଲ୍ କମ୍ପ୍ଲେକ୍ସର ଟ୍ରାଇମେରିକ୍ ସଂଗଠନ ଖମୀର ଲିଉସିନ୍ ଜିପର୍ GCN424 ଦ୍ native ାରା ଦେଶୀ Hv1 ସିସିଡି ବଦଳାଇବା ଦ୍ୱାରା ହୋଇପାରେ | Hv1 ଚ୍ୟାନେଲର ସବନିଟ୍ ସଂଗଠନର ନିକଟରେ ହୋଇଥିବା ଏକ ଅଧ୍ୟୟନରେ ସିଦ୍ଧାନ୍ତ ନିଆଯାଇଛି ଯେ ଦ୍ S ିତୀୟ ସଂରଚନାରେ କ dis ଣସି ବ୍ୟାଘାତ ବିନା ଦୁଇଟି S4 ହେଲିକ୍ସ ସିସିଡିରେ ପରିବର୍ତ୍ତନ ହୋଇଛି, ଫଳସ୍ୱରୂପ ଲମ୍ବା ହେଲିକ୍ସ ଯାହା ମେମ୍ବ୍ରାନରୁ ଆରମ୍ଭ ହୋଇ ସାଇଟୋପ୍ଲାଜାମରେ ପ୍ରବେଶ କରେ | ସିଷ୍ଟାଇନ୍ କ୍ରସ୍ ଲିଙ୍କିଙ୍ଗ୍ ବିଶ୍ଳେଷଣ ଉପରେ ଆଧାର କରି, ଏହି ଅଧ୍ୟୟନ ପ୍ରସ୍ତାବ ଦେଇଛି ଯେ H4 VSD ଗୁଡିକ S4 ସେଗମେଣ୍ଟରେ ପରସ୍ପର ସହିତ ଯୋଗାଯୋଗ କରନ୍ତି | ତଥାପି, ଅନ୍ୟ ଅଧ୍ୟୟନଗୁଡ଼ିକ VSD ମଧ୍ୟରେ ବିକଳ୍ପ ଇଣ୍ଟରଫେସ୍ ପ୍ରସ୍ତାବ ଦେଇଛନ୍ତି | ଏହି ଇଣ୍ଟରଫେସଗୁଡ଼ିକରେ S1 ସେଗମେଣ୍ଟ 17, 21, 26 ଏବଂ S2 ସେଗମେଣ୍ଟର ବାହ୍ୟ ପ୍ରାନ୍ତ 21. ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ ହେବାର ଏକ ସମ୍ଭାବ୍ୟ କାରଣ | ଏହି ଅଧ୍ୟୟନଗୁଡିକର ଫଳାଫଳ ହେଉଛି ଯେ VSD ଗୁଡ଼ିକ ମଧ୍ୟରେ ଆଲୋଷ୍ଟେରିକ୍ ଯୋଡି ଯାଞ୍ଚ ପ୍ରକ୍ରିୟା ସମ୍ବନ୍ଧରେ ପରୀକ୍ଷଣ କରାଯାଇଥିଲା, ଯାହା ବନ୍ଦ ଏବଂ ଖୋଲା ରାଜ୍ୟ ଉପରେ ନିର୍ଭର କରେ, ଏବଂ VSD ମଧ୍ୟରେ ଇଣ୍ଟରଫେସ୍ ବିଭିନ୍ନ ରାଜ୍ୟ ପରିବର୍ତ୍ତନରେ ଭିନ୍ନ ହୋଇପାରେ | ଏଠାରେ, ଆମେ ଜାଣିଲୁ ଯେ 2-ଗୁଆନାଡିନୋଥିଆଜୋଲ୍ ଦୁଇଟି ଖୋଲା VSD କୁ ସିନର୍ଜିଷ୍ଟିକ୍ ଭାବରେ ବାନ୍ଧିବା ଦ୍ୱାରା Hv1 ଚ୍ୟାନେଲଗୁଡିକୁ ପ୍ରତିବନ୍ଧିତ କରେ ଏବଂ ଖୋଲା ଅବସ୍ଥାରେ ସବନିଟ୍ ମଧ୍ୟରେ ପାରସ୍ପରିକ ସମ୍ପର୍କ ଯାଞ୍ଚ କରିବାକୁ ଯ ounds ଗିକ ମଧ୍ୟରୁ 2-ଗୁଆନାଡିନୋବେଞ୍ଜୋଥିଆଜୋଲ୍ (GBTA) ବ୍ୟବହାର କଲା | ଇଣ୍ଟରଫେସ୍। ଆମେ ଜାଣିଲୁ ଯେ GBTA ବାଇଣ୍ଡିଂ ବକ୍ରକୁ ଏକ ପରିମାଣିକ ମଡେଲ ଦ୍ୱାରା ଭଲ ଭାବରେ ବର୍ଣ୍ଣନା କରାଯାଇପାରିବ ଯେଉଁଥିରେ ଗୋଟିଏ ସବନିଟ୍ ସହିତ ଏକ ଇନହିବିଟର ବାନ୍ଧିବା ଦ୍ the ାରା ସଂଲଗ୍ନ ସବନିଟ୍ ର ବନ୍ଧନ ସମ୍ବନ୍ଧୀୟତା ବୃଦ୍ଧି ପାଇଥାଏ | ଚ୍ୟାନେଲ୍ 27, 28 ଏବଂ ଗୁଆନାଡାଇନ୍ ଡେରିଭେଟିଭ୍ ବାଇଣ୍ଡିଂ ସାଇଟ୍ 29 ନିୟନ୍ତ୍ରଣ GBTA ବାଇଣ୍ଡ କୋଅପରେଟିଭ୍ କୁ ଆମେ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କରୁ | ଆମେ ଦେଖାଉ ଯେ Hv1 ଡାଇମର୍ ରେ କୋଅପରେଟିଭ୍ ବାଇଣ୍ଡିଂ ରକ୍ଷଣାବେକ୍ଷଣ କରାଯାଏ, ଯେଉଁଠାରେ ସିସିଡି S4 ସେଗମେଣ୍ଟରୁ ଅଲଗା ହୋଇ ସିସିଡିରେ ଥିବା ଇଣ୍ଟରସୁବୁନିଟ୍ ଇଣ୍ଟରଫେସ୍ ସିଧାସଳଖ ନୁହେଁ | GBTA- ବାନ୍ଧୁଥିବା ସାଇଟଗୁଡିକ ମଧ୍ୟରେ ମଧ୍ୟସ୍ଥି ଆଲୋଷ୍ଟେରିକ୍ କପଲିଂ | ଏହାର ବିପରୀତରେ, ଆମେ ଜାଣୁ ଯେ S1 ଖଣ୍ଡଟି ସବନିଟ୍ ମଧ୍ୟରେ ଇଣ୍ଟରଫେସର ଏକ ଅଂଶ ଏବଂ ଅନୁମତି ଦେବା ପାଇଁ ଡାଇମର୍ ମଧ୍ୟଭାଗରୁ S4 ହେଲିକ୍ସର ଏକ୍ସଟ୍ରାସେଲୁଲାର୍ ଶେଷ ସହିତ ସଂଲଗ୍ନ VSD ଗୁଡ଼ିକର ଏକ ବ୍ୟବସ୍ଥା ପ୍ରସ୍ତାବ ଦିଏ | ଖୋଲା ଅବସ୍ଥାରେ ରହିବାକୁ S1 ଖଣ୍ଡ | Hv1 ର ଛୋଟ ମଲିକ୍ୟୁଲ୍ ଇନହିବିଟରଗୁଡିକ ଆଣ୍ଟିକାନ୍ସର୍ drugs ଷଧ ଏବଂ ନ୍ୟୁରୋପୋଟେକ୍ଟିଭ୍ ଏଜେଣ୍ଟ ଭାବରେ ଉପଯୋଗୀ | ତଥାପି, ଆଜି ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ, କିଛି ଯ ounds ଗିକ ଚ୍ୟାନେଲକୁ 30,31,32,33 ରୋକିବାରେ ସକ୍ଷମ ହୋଇଛନ୍ତି | ସେମାନଙ୍କ ମଧ୍ୟରେ, 2-ଗୁଆନାଡିନୋବେଞ୍ଜିମିଡାଜୋଲ (2GBI, ଯ ound ଗିକ [1] | । ପୂର୍ବରୁ 200 μM (ଚିତ୍ର 1 ବି) ର ଏକାଗ୍ରତାରେ ପରୀକ୍ଷଣ କରାଯିବାବେଳେ Hv1 କୁ 2GBI ଭଳି ପ୍ରଭାବଶାଳୀ ଭାବରେ ପ୍ରତିରୋଧ କରିବାକୁ ଦର୍ଶାଯାଇଥିଲା | ପାଠ୍ୟ) .ଆପଣ ଚାରୋଟି ଥିଆଜୋଲ୍ ଡେରିଭେଟିଭ୍ (GBTA ଏବଂ ଯ ounds ଗିକ [3], [6] ଏବଂ [11], ଚିତ୍ର 1c) ର ଏକାଗ୍ରତା ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ବକ୍ର ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରିଥିଲୁ ଏବଂ ଜାଣିବାକୁ ପାଇଲୁ ଯେ ସେମାନେ 2GBI ତୁଳନାରେ ଅଧିକ ଅଟନ୍ତି | ହିଲ୍ କୋଏଫେସିଏଣ୍ଟସ୍ (h) ଥିଆଜୋଲ୍ ଡେରିଭେଟିଭ୍ ଗୁଡିକ 1.109 ± 0.040 ରୁ 1.306 ± 0.033 ମଧ୍ୟରେ ଥିଲା (ଚିତ୍ର) | 1c ଏବଂ ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟାରୀ ଡ଼ିମ୍। 1) ଏହାର ବିପରୀତରେ, 2GBI ପାଇଁ ହିଲ୍ କୋଏଫିସିଏଣ୍ଟ୍ ଥିଲା 0.975 ± 0.024 29, ଚିତ୍ର 2a ଏବଂ ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟାରୀ ଚିତ୍ର 1) .ଏହା ଉପରେ ଥିବା ହିଲ୍ କୋଏଫିସିଣ୍ଟେଣ୍ଟ ସହଯୋଗୀତାକୁ ସୂଚାଇଥାଏ | କାରଣ ପ୍ରତ୍ୟେକ Hv1 ସବନିଟ୍ ର ନିଜସ୍ୱ ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ଅଛି | ବାନ୍ଧିବା ସାଇଟ୍, 29,32 ଆମେ ଯୁକ୍ତି କଲୁ ଯେ ଗୋଟିଏ ସବନିଟ୍ ରେ ଏକ ଥିଆଜୋଲ୍ ଡେରିଭେଟିଭ୍ ବାନ୍ଧିବା ଦ୍ sub ିତୀୟ ସବନିଟ୍ ଦ୍ second ାରା ଦ୍ୱିତୀୟ ଇନହିବିଟର ଅଣୁର ବନ୍ଧନକୁ ବ enhance ାଇପାରେ | GBTA ସର୍ବୋଚ୍ଚ ହିଲ୍ କୋଏଫିସିଏଣ୍ଟ୍ ସହିତ ପରୀକ୍ଷଣ ଯ ound ଗିକ ଅଟେ | ସିନର୍ଜି ବାନ୍ଧିବା ପ୍ରଣାଳୀକୁ ଅଧିକ ଅଧ୍ୟୟନ କରନ୍ତୁ ଏବଂ 2GBI କୁ ଏକ ରେଫରେନ୍ସ ନକାରାତ୍ମକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଭାବରେ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ | (କ) ପରୀକ୍ଷା ଯ ounds ଗିକଗୁଡିକ: ୨-ଗୁଆନାଡିନୋ-ବେନୋଜୋଥିଆଜୋଲ (GBTA), [3] -ଗୁଆନିଡାଇନ୍, [5] ଫାମୋଟିଡାଇନ୍, ] 12] 1- [4- (3,4-dimethoxyphenyl) -1,3-thiazol-2-yl] guanidine। .Hv1 ପ୍ରୋଟନ୍ ସ୍ରୋତଗୁଡିକ -80 mV ରୁ +120 mV ଧାରଣ କ୍ଷମତା ଠାରୁ ଡିପୋଲାରାଇଜେସନ୍ ପ୍ରତିକ୍ରିୟାରେ ଜେନୋପସ୍ ଓସାଇଟ୍ସର ଭିତର ପ୍ଲାକ୍ରେ ମାପ କରାଯାଇଥିଲା | ପ୍ରତ୍ୟେକ ଇନହିବିଟର 200 μM.pHi = pHo = 6.0 ଡାଟାର ଅର୍ଥ ହେଉଛି ± SEM (n≥4)। (ଗ) ଯ ounds ଗିକ ଦ୍ human ାରା ମାନବ Hv1 ର ଏକାଗ୍ରତା-ନିର୍ଭରଶୀଳ ପ୍ରତିବନ୍ଧକ [2], [3], [6] ଏବଂ [11] 15 ମାପ ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ | ରେଖା ହେଉଛି ଏକ ହିଲ୍ ଫିଟ୍ ଯାହା ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟାରୀ ଟେବୁଲ୍ 1 ରେ ରିପୋର୍ଟ ହୋଇଥିବା ସ୍ପଷ୍ଟ Kd ମୂଲ୍ୟ ପାଇବା ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ | 0.033, h (3) = 1.25 ± 0.07, h (6) = 1.109 ± 0.040, h (11) = 1.179 ± 0.036 (ପଦ୍ଧତି ଦେଖନ୍ତୁ) | a ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟାରୀ ଡ଼ିମ୍ 3 ଏବଂ 4 ରେ ରିପୋର୍ଟ ହୋଇଥିବା ଫିଟ୍ ରୁ ଇନସେଟ୍ ହିଷ୍ଟୋଗ୍ରାମ୍ ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରାଯାଇଥିଲା | (କ) ରେ ଦେଖାଯାଇଥିବା GBTA ର ଏକାଗ୍ରତା ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ଚିତ୍ର 1c ସହିତ ସମାନ | ସ୍ପଷ୍ଟ Kd ମୂଲ୍ୟ ପାଇଁ ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟାରୀ ଟେବୁଲ୍ 1 ଦେଖନ୍ତୁ | GBTA ର ଡାଇମେରିକ୍ Hv1 ର ସହଯୋଗୀ ବନ୍ଧନ ପ୍ରଥମ ଏବଂ ଦ୍ୱିତୀୟ ବନ୍ଧନ ଇଭେଣ୍ଟଗୁଡିକର ବିଭାଜନ ସନ୍ତୁଳନ ବକ୍ର ଯଥାକ୍ରମେ (ସବ୍ 1: OO + B ⇄ BO *, Kd1 = 290 ± 70 μM; ସବ୍ 2: BO * + B ⇄ B * O *, Kd2 = 29.3 ± 2.5 μM ) (ଘ) Hv1 ବ୍ଲକର ପ୍ରସ୍ତାବିତ ଯନ୍ତ୍ରର ସ୍କିଜେଟିକ୍ ଚିତ୍ର ଉଚ୍ଚ ଆଫିଫିନିଟି ଅବସ୍ଥାରେ ନୀଳ Hv1 ଚ୍ୟାନେଲଗୁଡିକ ସେମାନଙ୍କର N- ଏବଂ C- ଟର୍ମିନାଲ୍ ସାଇଟୋପ୍ଲାଜାମିକ୍ ଡୋମେନ୍ଗୁଡ଼ିକୁ ସିଓନା ଇଣ୍ଟେଷ୍ଟେନାଲିସ୍ ଭୋଲଟେଜ୍ ସମ୍ବେଦନଶୀଳ ଫସଫାଟେଜ୍ CiVSP (Hv1NCCiVSP) ର ଅନୁରୂପ ଅଂଶ ସହିତ ବଦଳାଇ ମୋନୋମେରାଇଜ୍ ହୋଇପାରିବ | ସେଗୁଡିକୁ ଡାଇମେରିକ୍ ଚ୍ୟାନେଲ୍ (ୱାଇଲ୍ଡ-ଟାଇପ୍) ପ୍ରତିବନ୍ଧକ (ଚିତ୍ର 2a, b) ସହିତ ତୁଳନା କର | ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ପାଇଁ ଅନ୍ୟ ସବନିଟ୍ ର ସ୍ନେହ ସ୍ନେହ ଚ୍ୟାନେଲରେ GBTA ର ସହଯୋଗୀ ବନ୍ଧନକୁ ପରିମାଣିକ ଭାବରେ ବର୍ଣ୍ଣନା କରିବାକୁ, ଆମେ ଏକ ମଡେଲ୍ ବ୍ୟବହାର କରିଥିଲୁ ଯେଉଁଥିରେ ସବନିଟ୍ ପ୍ରଥମ ଇନହିବିଟର ଅଣୁକୁ ଏକ ବିଚ୍ଛିନ୍ନ ସ୍ଥିର Kd1 (ଚିତ୍ର 2c, ସବ୍ 1, OO + B ⇆ BO *) ସହିତ ବାଇମୋଲ୍ୟୁକୁଲାର ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପରେ ବାନ୍ଧିପାରେ | ବାନ୍ଧିବା ଦ୍ୱାରା ଚ୍ୟାନେଲ ଏକ ସ୍ଥିତିକୁ ଗ୍ରହଣ କରେ ଯେଉଁଥିରେ ଅବଶିଷ୍ଟ ଖାଲି ସବନିଟ୍ ଗୁଡିକ ଏକ ପୃଥକ ବିମୋଲେକୁଲାର ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପରେ ଏକ ପୃଥକ ବିମୋଲେକୁଲାର ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପରେ ବାନ୍ଧନ୍ତି, ଯେଉଁଠାରେ Kd2 ଥରେ ଦ୍ୱିତୀୟ ଇନହିବିଟର ମଲିକ୍ୟୁଲ ବନ୍ଧା ହେବା ପରେ, ଉଭୟ ସବ୍ୟୁନିଟିରେ ଏକ ବିଚ୍ଛିନ୍ନତା ସ୍ଥିର Kd2 (ଚିତ୍ର 2d) ଥାଏ | ଡିପୋଲାରାଇଜେସନ୍ ଅବସ୍ଥାରେ (+120 mV) ଚାନେଲ୍ ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ମାପ କରାଯାଇଥିଲା | ଗୋଟିଏ ଖୋଲା ଏବଂ ଗୋଟିଏ ବନ୍ଦ ସବନିଟ୍ ସହିତ ଚ୍ୟାନେଲ୍ ପ୍ରଜାତିଗୁଡିକ (CC ⇄ OC transition ଦେଖନ୍ତୁ | OO ଚିତ୍ର 2d) ପୂର୍ବରୁ ଏହି ସର୍ତ୍ତଗୁଡିକରେ Hv1 କରେଣ୍ଟରେ ଅବହେଳିତ ଭାବରେ ଅବଦାନ ଥିବା ଦେଖିବାକୁ ମିଳିଥିଲା ​​19,20 ଏବଂ ଏହିପରି ସେଗୁଡିକ ବାଧ୍ୟତାମୂଳକ ମଡେଲରେ ଅନ୍ତର୍ଭୂକ୍ତ ହୋଇନଥିଲା | ଚିତ୍ର 2c ରେ ଥିବା କଠିନ କଳା ରେଖା ହେଉଛି ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ ଏକାଗ୍ରତା-ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ବକ୍ର ସହିତ ମଡେଲ୍ ସମୀକରଣର ଫିଟ୍, Kd1 ~ 290 μM ଏବଂ Kd2 ~ 29 μM (ପଦ୍ଧତି ବିଭାଗ, ସମୀକରଣ (6)) ଉତ୍ପାଦନ କରେ | ମଡେଲ୍ ମଧ୍ୟ ବର୍ଣ୍ଣନା କରେ | 2GBI ର ବନ୍ଧନ, ଯେଉଁଠାରେ Kd2 ≈ Kd1 = Kd (ଚିତ୍ର 2d) .ମୋନୋମେରିକ୍ Hv1 ରେ, କେବଳ ଗୋଟିଏ ବାନ୍ଧିବା ସ୍ଥାନ ଏବଂ ଗୋଟିଏ Kdm (O ° + B ⇆ B °) ଅଛି | GBTA କ୍ଷେତ୍ରରେ, Kdm ପ୍ରାୟ 54 | μM, ଯାହାକି Kd2 (ଚିତ୍ର 2d) ଅପେକ୍ଷା Kd1 ସହିତ ଅଧିକ ସମାନ | ଅନ୍ୟ ଅର୍ଥରେ, ମୋନୋମରର ବାନ୍ଧିବା ସ୍ଥାନ ଏକ ବିନ୍ୟାସନରେ (O °) ଉଚ୍ଚ-ଆଫିନିଟି ସ୍ଥିତି (BO *) ସହିତ କମ୍- ଡାଇମର୍ ର ଆଫିନିଟି ଷ୍ଟେଟ୍ (OO), ସବନିଟ୍ ମଧ୍ୟରେ ଇଣ୍ଟରଫେସ୍ ବିଲୋପ ହେତୁ ସମ୍ଭବତ। | ପୂର୍ବରୁ 2GBI32 ପାଇଁ ଦେଖାଯାଇଥିବା ପରି, ଆମେ ଜାଣିଲୁ ଯେ GBTA Hv1 ସ୍ରୋତକୁ ଚ୍ୟାନେଲ ଖୋଲିବା ସମୟରେ ଏହାକୁ ଖୋଲିବା କଷ୍ଟକର କରିବା ପରିବର୍ତ୍ତେ ଦମନ କରିଥିଲା ​​(ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟାରୀ ଚିତ୍ର 2a, b, d) .2GBI ମଧ୍ୟ ଧୀରେ ଧୀରେ କ୍ଷୟ ହେଉଥିବା ଲାଞ୍ଜ ସ୍ରୋତକୁ ପ୍ରବର୍ତ୍ତାଇଥାଏ | ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ରିପୋଲାରାଇଜେସନ୍ ପ୍ରତିକ୍ରିୟାରେ, କିନ୍ତୁ ଏହି ଘଟଣା GBTA (ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟାରୀ ଡ଼ିମ୍। 2c) ରେ ଦେଖାଗଲା ନାହିଁ | 2GBI ଙ୍କ ଉପସ୍ଥିତିରେ Hv1 ନିଷ୍କ୍ରିୟତା ଉପସ୍ଥିତିରେ, ବ୍ଲକର୍ ବାନ୍ଧିବା ସ୍ଥାନ ଛାଡିବା ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ପ୍ରତ୍ୟେକ ସବନିଟ୍ ର ଫାଟକ ବନ୍ଦ ହୋଇପାରିବ ନାହିଁ | ଫୁଟ୍ ଗେଟ୍ "ମେକାନିଜିମ୍", ଏବଂ 2GBI ଫାଟକ ବନ୍ଦ ହେବା ଅପେକ୍ଷା ମନ୍ଥର ଗତି କରେ | ଯଦି ଗୋଟିଏ Hv1 ସବନିଟ୍ ଅନଲକ୍ ଏବଂ ବନ୍ଦ ହୋଇଯାଏ, ଯେତେବେଳେ ସଂଲଗ୍ନ ସବନିଟ୍ ଅବରୋଧ ହୋଇ ରହିଥାଏ, ଅବଶିଷ୍ଟ 2GBI ଅଣୁଗୁଡ଼ିକର ବନ୍ଧନ ଧୀର ହୋଇଯାଏ (ବ୍ଲକର୍ କ୍ୟାପଚର) | ବନ୍ଦ ହେବା ପୂର୍ବରୁ କେବଳ ଗୋଟିଏ ଅବରୋଧିତ ସବନିଟ୍ ଆଚରଣ ପ୍ରୋଟନ୍ କ୍ଷଣସ୍ଥାୟୀ ଭାବରେ କ୍ଷୟ ହେଉଥିବା ଲାଞ୍ଜ କରେଣ୍ଟରେ ଏକ ମହତ୍ contribution ପୂର୍ଣ ଅବଦାନ ଦେଇଥାଏ | GBTA (ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟାରୀ ଡ଼ିମ୍। 2c) ର ଉପସ୍ଥିତିରେ Hv1 ଲାଞ୍ଜ ସ୍ରୋତଗୁଡିକର କ୍ଷୟ ଯଥେଷ୍ଟ ମନ୍ଥର ହୋଇନଥିବା ଅନୁସନ୍ଧାନ ଏହି ବ୍ଲକର୍ ପାଇଁ ଏକ ସିନର୍ଜିଷ୍ଟିକ୍ ବାଇଣ୍ଡିଂ ମେକାନିଜିମ୍ ସହିତ ସମାନ ଅଟେ (ଚିତ୍ର 2d) .ଏହାପରେ ଏକ GBTA ଅଣୁ Hv1 ସବନିଟ୍ ରୁ ସୀମିତ | , ଅବରୋଧକାରୀ ପ୍ରକ୍ରିୟାକୁ ସମର୍ଥନ କରି ବ୍ଲକରର ସଂଲଗ୍ନତା ପ୍ରାୟ 10 ଗୁଣା ହ୍ରାସ ହୁଏ | ଏହାର ଅର୍ଥ ହେଉଛି ଯେ GBTA ର ଦ୍ୱିତୀୟ ଅଣୁଟି ଚ୍ୟାନେଲରେ ଫସିଯିବା ପୂର୍ବରୁ ଖୋଲିବାର ଅଧିକ ସମ୍ଭାବନା ଥାଏ | ଦୀର୍ଘ ଜୀବନ ବିଶିଷ୍ଟ ଚ୍ୟାନେଲ ପ୍ରଜାତି ଯାହା କେବଳ ଗୋଟିଏ ବ୍ଲକିଂ ସବନିଟ୍ ଉତ୍ପାଦନ 2GBI ର ଉପସ୍ଥିତି ଅପେକ୍ଷା GBTA ର ଉପସ୍ଥିତିରେ ବହୁତ ଅଧିକ ହେବ ବୋଲି ଆଶା କରାଯାଏ, ଫଳସ୍ୱରୂପ ଲାଞ୍ଜର ଶୀଘ୍ର କ୍ଷୟ ହୁଏ | GBTA ପାଇଁ ଉଭୟ Hv1 ସବନିଟ୍ ସହିତ ମିଳିତ ଭାବରେ ବାନ୍ଧିବା ପାଇଁ, ବାଇଣ୍ଡିଂ ସାଇଟଗୁଡିକ ନିଶ୍ଚିତ ଭାବରେ ଯୋଡି ହେବା ଆବଶ୍ୟକ | ପ୍ରତ୍ୟେକ ବାଇଣ୍ଡିଂ ସାଇଟ୍ ନିଶ୍ଚିତ ଭାବରେ ସକ୍ଷମ ହେବା ଆବଶ୍ୟକ: 1) ଇଭେଣ୍ଟଗୁଡିକର ଏକ ଶୃଙ୍ଖଳା ସୃଷ୍ଟି କରିବା ଯାହା ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ସହିତ ବନ୍ଧା ହୋଇଥିବା ସବନିଟ୍ ସହିତ ଯୋଗାଯୋଗ କରେ, ଏବଂ 2) ମଧ୍ୟସ୍ଥତା | ନିମ୍ନ-ଆଫିନିଟିରୁ ଉଚ୍ଚ-ଆଫିନିଟି ବାଇଣ୍ଡିଂକୁ ପରିବର୍ତ୍ତନ , S181 ଏବଂ R211 ପୂର୍ବରୁ 2GBI29 ବନ୍ଧନ ପରିବେଶର ଏକ ଅଂଶ ଭାବରେ ଦର୍ଶାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ଆମେ ଅନୁମାନ କରିଥିଲୁ ଯେ ସେମାନେ ସମାନ ଭାବରେ GBTA ବନ୍ଧନରେ ଜଡିତ ହେବେ (ଚିତ୍ର 3A) .ଆପଣ ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟ ଚ୍ୟାନେଲ D112E, F150A, S181A ପାଇଁ GBTA ର ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ଏକାଗ୍ରତା-ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ବକ୍ର ମାପ କରିଥିଲୁ | , ଏବଂ R211S (ଚିତ୍ର 3) ଏବଂ ସେମାନଙ୍କର ହିଲ୍ କୋଏଫେସିଏଣ୍ଟସ୍ କୁ Hv1 ୱାଇଲ୍ଡ-ଟାଇପ୍ ସହିତ ତୁଳନା କରି 2GBI କୁ ରେଫରେନ୍ସ ଭାବରେ ବ୍ୟବହାର କରେ | ରେସିଡ୍ୟୁ V109 S1 ସେଗମେଣ୍ଟର D112 ସହିତ ସମାନ ଏବଂ ସେଲ୍ ଭିତରେ ଗୋଟିଏ ଅତିରିକ୍ତ ହେଲିକାଲ୍ ଟର୍ନ୍ ଅଛି | V109 2GBI29 ର ବନ୍ଧନରେ ଜଡିତ ନଥିଲା, ଆମେ V109A ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟକୁ ଏକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଭାବରେ ବ୍ୟବହାର କରିଥିଲୁ (ଚିତ୍ର) | 3 ବି) (କ) ଗୁଆନାଡାଇନ୍ ଡେରିଭେଟିଭ୍ ବାଇଣ୍ଡିଂରେ ଜଡିତ Hv1 ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶଗୁଡିକ ଡ୍ୟାସ୍ ହୋଇଥିବା ନୀଳ ବକ୍ରଗୁଡିକ ପୂର୍ବରୁ ପ୍ରସ୍ତାବିତ ପାର୍ଶ୍ୱ ଶୃଙ୍ଖଳାକୁ ଘେରି ରହିଥାଏ ଯାହା ଯ ound ଗିକ 2GBI29 ର ବିଭିନ୍ନ ଅଂଶ ସହିତ ପାରସ୍ପରିକ ଭାବରେ କାର୍ଯ୍ୟ କରିଥାଏ | ଗା dark ଲାଲ୍) .ଏକ ବିନ୍ଦୁ 3 ରୁ 12 ମାପର ହାରାହାରି ପ୍ରତିବନ୍ଧକକୁ ପ୍ରତିପାଦିତ କରେ ± SD V109 ଏକ ନକାରାତ୍ମକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଭାବରେ | କର୍ଭସ୍ ହେଉଛି ହିଲ୍ ଫିଟ୍ ଯାହା ସ୍ପଷ୍ଟ Kd ମୂଲ୍ୟ ପାଇବା ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ (ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟାରୀ ସାରଣୀ 1 ଦେଖନ୍ତୁ) | ହିଲ୍ କୋଏଫେସିଏଣ୍ଟସ୍ (h) ରେ ଦର୍ଶାଯାଇଛି | ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟାରୀ ଡ଼ିମ୍ 3 ଏବଂ 4. ରେ ରିପୋର୍ଟ ହୋଇଥିବା ଫିଟ୍ ରୁ ଇନସେଟ୍ ହିଷ୍ଟୋଗ୍ରାମ୍ ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରାଯାଇଥିଲା | Hv1 WT ପାଇଁ ରେଫରେନ୍ସ h ମୂଲ୍ୟଗୁଡିକ ଡ୍ୟାଶ୍ ରେଖା ଭାବରେ ପ୍ରଦର୍ଶିତ ହୋଇଛି | । ଆମେ ଜାଣିଲୁ ଯେ D112E ମ୍ୟୁଟେସନ୍ ହିଲ୍ କୋଏଫିସିଣ୍ଟେଣ୍ଟକୁ ଯଥେଷ୍ଟ ହ୍ରାସ କରିଛି (p 0.05, ଚିତ୍ର 5d, i) ) ଅନ୍ୟ ପଟେ, ମ୍ୟୁଟେସନ୍ D123A GBTA ର ହିଲ୍ କୋଏଫିସିଣ୍ଟେଣ୍ଟକୁ ଯଥେଷ୍ଟ ହ୍ରାସ କଲା (p 0.05/14) | ଯେହେତୁ ଉଭୟ ସବନିଟ୍ ଉପରେ 123 ସ୍ଥିତିରେ ଚାର୍ଜକୁ ନିରପେକ୍ଷ କରିବା ଦ୍ GB ାରା GBTA ବନ୍ଧନ ସହଯୋଗରେ ଏକ ଦୃ strong ପରିବର୍ତ୍ତନ ଘଟିଥିଲା, ଯେତେବେଳେ ଉଭୟ ସବନିଟ୍ ଉପରେ ଚାର୍ଜକୁ ଓଲଟପାଲଟ କରିବାର ଏକ ଛୋଟ ପ୍ରଭାବ ରହିଥିଲା, ଆମେ ଚାର୍ଜର ବିପରୀତ ଚ୍ୟାନେଲ ସହିତ କେବଳ ଗୋଟିଏ ସବନିଟ୍ ଅନ୍ତର୍ଭୂକ୍ତ କରିବା ପାଇଁ ବିଶ୍ଳେଷଣକୁ ବ extended ାଇଥିଲୁ | ସି-ଟର୍ମିନାଲ୍ ସବନିଟ୍ (ଚିତ୍ର 5b) ରେ D123R ପ୍ରତିସ୍ଥାପନ ସହିତ Hv1- ଲିଙ୍କ୍ ହୋଇଥିବା ଡାଇମର୍ ସୃଷ୍ଟି କଲା ଏବଂ GBTA ଏବଂ 2GBI ଦ୍ concent ାରା ଏକାଗ୍ରତା-ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରତିବନ୍ଧକକୁ ମାପ କଲା | ବନ୍ୟ ପ୍ରକାର Hv1 ର (p 0.05) | ଆମେ ଏହା ମଧ୍ୟ ପାଇଲୁ ଯେ βME ର ଅନୁପସ୍ଥିତିରେ, D112E I127C Hv1 ଡାଇମର୍ ସହିତ ବାନ୍ଧୁଥିବା GBTA ର ହିଲ୍ କୋଏଫିସିଏଣ୍ଟ୍ ହ୍ରାସକାରୀ ଏଜେଣ୍ଟମାନଙ୍କ ଉପସ୍ଥିତିରେ ମାପାଯାଇଥିବା ତୁଳନାରେ ଯଥେଷ୍ଟ ଅଧିକ ଥିଲା (ଚିତ୍ର 6e ଏବଂ ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟାରୀ ଚିତ୍ର 4), ଏହା ଦର୍ଶାଏ ଯେ D112E ପରିବର୍ତ୍ତନ | ସିଷ୍ଟାଇନ୍ 127 ର କ୍ରସ୍-ଲିଙ୍କ୍ ହେତୁ GBTA ବାଇଣ୍ଡ କୋଅପରେଟିଭ୍ ର ବୃଦ୍ଧିକୁ ରଦ୍ଦ କରିନାହିଁ | D112E, I127C Hv1 ଡାଇମର୍ ସହିତ 2GBI ବାନ୍ଧୁଥିବା ହିଲ୍ କୋଏଫିସିଣ୍ଟେଣ୍ଟ ମଧ୍ୟ D112E ମ୍ୟୁଟେସନ୍ (ଚିତ୍ର 1) .6d ଏବଂ ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟାରୀ ଦ୍ୱାରା ବିଶେଷ ପ୍ରଭାବିତ ହୋଇନଥିଲା | ଚିତ୍ର 3) | ଏକତ୍ର ନିଆଗଲା, ଏହି ଅନୁସନ୍ଧାନଗୁଡିକ ସୂଚିତ କରେ ଯେ ଆକର୍ଷଣୀୟ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଷ୍ଟାଟିକ୍ ପାରସ୍ପରିକ କ୍ରିୟା ମାଧ୍ୟମରେ କିମ୍ବା ସାଇଟଗୁଡିକ ମଧ୍ୟରେ ପ୍ରତିସ୍ଥାପିତ ସିଷ୍ଟାଇନ୍ସ ଆଲୋଷ୍ଟେରିକ୍ କପଲିଙ୍ଗ୍ ମଧ୍ୟରେ କୋଭାଲାଣ୍ଟ ବଣ୍ଡ ଗଠନ ମାଧ୍ୟମରେ ସଂଲଗ୍ନ Hv1 ସବନିଟ୍ ଗୁଡିକରେ ଥିବା S1 ଖଣ୍ଡଗୁଡ଼ିକର ବାହ୍ୟ ପ୍ରାନ୍ତ ମଧ୍ୟରେ ପାରସ୍ପରିକ କ୍ରିୟା ଦ୍ୱାରା GBTA ବନ୍ଧନ ବୃଦ୍ଧି କରାଯାଇଥାଏ | ସହଯୋଗୀତା ଉପରେ ଆକର୍ଷଣୀୟ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଷ୍ଟାଟିକ୍ ପାରସ୍ପରିକ ପ୍ରଭାବର ପରିବର୍ତ୍ତନ D112E ଦ୍ୱାରା ବିଲୋପ ହୋଇପାରେ, କୋଭାଲାଣ୍ଟ ବଣ୍ଡର ପ୍ରଭାବ ହୋଇପାରିବ ନାହିଁ | Hv1 ଚ୍ୟାନେଲରେ ଗୁଆନାଡାଇନ୍ ଡେରିଭେଟିକ୍ସକୁ ବାନ୍ଧିବା ପାଇଁ ଉପଲବ୍ଧ ରାସାୟନିକ ସ୍ଥାନ ବିଷୟରେ ଆମର ଅନୁସନ୍ଧାନରେ, ଆମେ ଜାଣିଲୁ ଯେ GBTA ପରି 2-ଗୁଆନାଡିନୋଥିଆଜୋଲ୍ 2-ଗୁଆନାଡିନୋବେଞ୍ଜିମିଡାଜୋଲ୍ (ଚିତ୍ର 1c) ଅପେକ୍ଷା ଅଧିକ ଘନୀଭୂତ ନିର୍ଭରଶୀଳତା ଅଟେ | ଏବଂ ମୋନୋମେରିକ୍ ଚ୍ୟାନେଲଗୁଡିକ (ଚିତ୍ର 2a, b) ଏବଂ ଡାଇମେରିକ୍ ଚ୍ୟାନେଲ୍ ଯେଉଁଥିରେ ଗୋଟିଏ ସବନିଟ୍ ଇନହିବିଟର (ଚିତ୍ର 4) ସହିତ ପୂର୍ବରୁ ବନ୍ଧା ହୋଇଥିଲା ଆମକୁ ସିଦ୍ଧାନ୍ତ ନେବାକୁ ଲାଗିଲା ଯେ GBTA ଦ୍ H ାରା Hv1 ର ପ୍ରତିବନ୍ଧକ କାର୍ଯ୍ୟ ହେଉଛି ଏକ ସିନର୍ଜିଷ୍ଟିକ୍ ପ୍ରକ୍ରିୟା, ଏବଂ ଦୁଇଟି ସବନିଟ୍ ରେ ଥିବା ଯ ounds ଗିକର ବାନ୍ଧିବା ସ୍ଥାନଗୁଡିକ ଆଲୋଷ୍ଟେରିକ୍ ଭାବରେ ଯୋଡି ହୋଇଛି | GBTA ଖୋଲା ଚ୍ୟାନେଲରେ ବାନ୍ଧୁଥିବା ଆବିଷ୍କାର, ଯେପରି ସମ୍ପୃକ୍ତ ଯ ound ଗିକ 2GBI32 ପାଇଁ ପୂର୍ବରୁ ଦେଖାଯାଇଥିଲା, ସୂଚିତ କରେ ଯେ ଖୋଲା ଅବସ୍ଥାରେ ଆଲୋଷ୍ଟେରିକ୍ କପଲିଂକୁ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ଭାବରେ ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ କରାଯାଇପାରିବ | ଆମର ସହଯୋଗୀ ବନ୍ଧନ ମଡେଲ୍ | GBA (ଚିତ୍ର 2C 2C) ଦ୍ୱାରା HV1 ର ପ୍ରତିବନ୍ଧକକୁ ପରିଷ୍କାର ଭାବରେ ବର୍ଣ୍ଣନା କରିବାକୁ ସକ୍ଷମ ହୋଇଥିଲା ଏବଂ ମେମ୍ବ୍ରିନ୍ ରେପୋଲାଇଜରଗୁଡିକର ବିଭିନ୍ନ ପ୍ରଭାବକୁ ମେମ୍ବ୍ରେ ଏବଂ GBA ରାଇଜର ବିଭିନ୍ନ ପ୍ରଭାବକୁ ବ୍ୟାଖ୍ୟା କରେ, ଯାହା ବାନ୍ଧିବା ପ୍ରକ୍ରିୟାର ବ୍ୟାୟାମକୁ ସମର୍ଥନ କରେ | ଦୁଇଟି ବାନ୍ଧିବା ସ୍ଥାନ ସହିତ ଏକ ଆଲିଙ୍ଗନିକ୍ ପ୍ରୋଟିନ୍ରେ ସର୍ବାଧିକ ପାହାଡକୁ (ଯେପରିକି HV1) ସହିତ ହାସଲ କରାଯାଇପାରେ, ଯାହା HV1 I127C ରେ 1.88 କୁ ବୃଦ୍ଧି ପାଇଲା | ସିରଜିଣ୍ଟିକ୍ ମୁକ୍ତ ଶକ୍ତି, ସର୍ବନିମ୍ନ ଏବଂ ସର୍ବୋଚ୍ଚ ଇଭିଫି ସାଇଟଗୁଡିକର ବାଧ୍ୟତାମୂଳକ ମୁକ୍ତ ଶକ୍ତି ମଧ୍ୟରେ ପାର୍ଥକ୍ୟ (ପଦ୍ଧତି ଦେଖନ୍ତୁ), hv1 i127c.The। ହେମୋଗ୍ଲୋବିନକୁ ଅମ୍ଳଜାନର ସବୁଠାରୁ ପ୍ରସିଦ୍ଧ ଏବଂ ସୁସଜ୍ଜିତଗତ ପ୍ରକ୍ରିୟାକୃତ ଉଦାହରଣ (ମାନବ ହେମୋଗ୍ଲୋବିନ୍ ର ସବୁଠାରୁ ପ୍ରସିଦ୍ଧ ଏବଂ ପରିଚାଳିତ ଉଦାହରଣ (58 ରୁ 3.64 ରୁ 3.64 ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ), | 2.26 ରୁ 3.64 ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ | ପରୀକ୍ଷକ ସର୍ତ୍ତ / Mall ଆମର ସିନର୍ଜ୍ୟୋଇ ମଡେଲରେ, GBA ଅଣୁଗୁଡ଼ିକ ପାଇଁ ଗୋଟିଏ ସବନିଟ୍ ସହିତ ଏକ ସବନିଟ୍ ବାନ୍ଧିବା, ଯାହାକି ପ୍ରଥମ ବାନ୍ଧିବା ପରିବେଶର ଏକ ପୁନ arr ନିର୍ମାଣ | ଏହି ପରିବର୍ତ୍ତନଗୁଡିକ ଉପରେ ଥିବା ପାରସ୍ପରିକ କ୍ରିୟାଗୁଡ଼ିକରେ ପରିବର୍ତ୍ତନ, ଏବଂ ସଂଲଗ୍ନ ସବଙ୍ଗେଟିଗୁଡିକ ସେମାନଙ୍କର ବାନ୍ଧିବା ସ୍ଥାନଗୁଡ଼ିକୁ ପରିବର୍ତ୍ତନ କରିଥାଏ, ଏହି ପ୍ରକ୍ରିୟା ବୃଦ୍ଧି ବାନ୍ଧିବା ପାଇଁ, ବର୍ଦ୍ଧିତ ବାନ୍ଧିବା ପାଇଁ ଜଡିତ ବାନ୍ଧିବା ସ୍ଥାନର ପୁନ inging ଆରମ୍ଭ ପାଇଁ ଦାୟୀ, dverpartate perity.d11 ପୂର୍ବରୁ HV1 ପ୍ରୋଟଟନ୍ ପରମାଳାର ପଥର ଏକ ଅଂଶ ହେବା ଏବଂ ସିଲେକ୍ଟ ହୋଇଥିବା ଫିଲ୍ଟର୍ 2,28 ଭାବରେ କାର୍ଯ୍ୟ କରିବା | ଆମର ଫଳାଫଳଗୁଡିକ ଦେଖାନ୍ତୁ, ଦୁଇଟି Hv1 ସବନେସ୍ ରେ ଥିବା ମନୋନୀତତା ଫିଲ୍ଟର୍ ଗୁଡିକ ଖୋଲା ସ୍ଥିତି ରେ ଓଲଟା ବାନ୍ଧିବା ସ୍ଥାନ | HV1-CIVSP ଚିମେରା ର ସ୍ଫଟିକ୍ ଗଠନରେ ଆଲୋସେଣ୍ଟିକ୍ କଇଁଛ ପାଇଁ ଆଲୋସେଣ୍ଟିକ୍ କୋପୁଲିଂ ପାଇଁ ଆଲୋସେଣ୍ଟିକ୍ କୋପୁଲିଂ ପାଇଁ ଆଲୋସେଣ୍ଟିକ୍ ଡୁଲିଂ ପାଇଁ ଆଲୋସେଣ୍ଟିକ୍ କୋପଲିଂ ପାଇଁ ଆଲୋସେଣ୍ଟିକ୍ ଡୁଲିଂ ପାଇଁ ଆଲୋସେଣ୍ଟିକ୍ କୋଜିଭାଇଲ୍ ପାଇଁ ଦେଖାଯାଇଛି | (କ) HV1 VSD ର ସ୍କିମେଟିକ୍ | HV1-ସିଭସପ୍ ଜନଗର୍ଷର ସ୍ଫଟିକ୍ ସେଜ୍ ସିନ୍କନ୍ରିକ୍ | କୁ ccd ସହିତ (ଦେଖାଯାଇ ରଖନ୍ତୁ) | ବନ୍ଧା ହୋଇଥିବା GBA ର ପୂର୍ବ ନିର୍ଦ୍ଧାରିତ GBA ଭାବରେ ଦେଖାଯାଇଥିବା GRAY OValls.black ତୀରଗୁଡିକ ଏକ ସଂଲଗ୍ନ S1 ଅବଶିଷ୍ଟ ସ୍ଥାନଗୁଡିକ ରଙ୍ଗୀନ କ୍ଷେତ୍ର ସହିତ ଜଡିତ | ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ଫ୍ଲାସର ଏକ୍ସଚେଞ୍ଜର ବିସ୍ତାରରୁ ଦେଖାଯାଇଥିବା ପରି ଦୁଇଟି ଭିନ୍ନ ମୂଖ୍ୟ ବିନ୍ୟାସକରଣରେ ଦୁଇଟି ଭିନ୍ନ ପ୍ୟାନେଲରେ ଦେଖାଯାଇଛି, ବାଇଗଣୀ ଥିବା ଏକ ଅକ୍ଷରେ ଛକ 20 ଡିଗ୍ରୀ 20 ଡିଗ୍ରୀ ଚାରିପାଖରେ ଥିବା ଡିମର୍ ଇଣ୍ଟରଫେସ୍ 20 ଡିଗ୍ରୀ ଚାରିପାଖରେ ଗଠିତ | ଦୁଇଟି S4 ହେଲିକିର ବାହ୍ୟ ପ୍ରାନ୍ତକୁ ପୃଥକ କରନ୍ତୁ (ଭାଲୁ) ଡାହାଣରେ ଦେଖାଯାଇଥିବା ବ୍ୟବସ୍ଥା ସୃଷ୍ଟି କରେ, ଅବଶିଷ୍ଟ ଉପକଣ୍ଠରୁ ସଂଯୁକ୍ତ ଆକାରଗୁଡିକ ଏକତ୍ର କରିବାକୁ ଅନୁମତି ଦିଆଯାଇଛି | Civsp ରେ ଥିବା ଡିମରରେ ବିନ୍ୟାସରେ ମିଳିଲା | ଆମର ଫଳାଫଳଗୁଡିକ ଦର୍ଶାଏ ଯେ ଅବଶିଷ୍ଟ 123 ମଧ୍ୟରେ ଘୃଣ୍ୟ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଷ୍ଟାଟିକ୍ ପାରସ୍ପରିକ କ୍ରିୟା ଖୋଲା ଅବସ୍ଥାରେ GBA- ବାନ୍ଧିବା ସମନ୍ୱୟ ସ୍ତର ସହିତ ଜଡିତ (123D / 123r) ସହିତ ଜଡିତ (123D / 123R) , ସହଯୋଗ ବୃଦ୍ଧି (ଚିତ୍ର 5G) .IT ଆଶା କରାଯାଏ ଯେ ଆଲାନାଇନ୍ ପ୍ରତିସ୍ଥାପନ ସହିତ ଘୃଣ୍ୟ ପାରସ୍ପରିକ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପକୁ ହଟାଇବା ସହିତ, 123a / 123A ଡିମରର ଅବ alid ଧତା ମଧ୍ୟ ଘଟିବ .ଆପଣ ସମ୍ଭବ | ବ୍ୟାଖ୍ୟା ହେଉଛି ଏକ ହାଇଡ୍ରୋଫୋବିକ୍ ରହସ୍ୟରେ ହାଇଡ୍ରୋଫୋବିକ୍ ରହସ୍ୟରେ ଥିବା ହାଇଡ୍ରୋଫୋବିକ୍ ଅବଶିଷ୍ଟ ପରିବେଶ ପ୍ରଦାନ କରିବାର ମୂଲ୍ୟବାବିତ ପ୍ରଭାବ ଅତିକ୍ରମ କରିଥିଲା, ଫଳସ୍ୱରୂପ ଏକ ସାମଗ୍ରିକ ଆକ୍ସେସିବିଲିଟି ବିଷୟରେ ରିପୋର୍ଟ କରାଯାଇଥାଏ | CONEA GUUSIS CI-HV1 ର P171 (ମାନବ HV1 ରେ P123 ସହିତ) ପ୍ରୟୋଗ ହେବା ପରେ, D123 ଖୋଲା ଅବସ୍ଥାରେ ଥିବା ଏକ ହାଇଡ୍ରୋଫିଲ ପରିବେଶରେ ଅବସ୍ଥିତ | HV1 ଚ୍ୟାନଫେସ୍ ର ଲସିଟି ଏକାଧିକ ପରିବର୍ତ୍ତନ ମାଧ୍ୟମରେ ସଂକ୍ଷେପରେ ଜଣାଶୁଣା 1,5,39,40Und ରସିଂ, ci-hv1 ର ଭୋଲଟେଜ୍ ସେନସର ଏକ ରୂପାନ୍ତରିତ ପରିବର୍ତ୍ତନକୁ ଅତିକ୍ରମ କରେ ଯାହା ଚ୍ୟାନେଲକୁ ବନ୍ଦ କରିଦିଏ | , ପରେ ଏକ ଭିନ୍ନ ପରିବର୍ତ୍ତନ ଯାହାକି ଉଭୟ ଗଣ୍ଡଗୋଟ୍ସରେ ପ୍ରୋଟ୍ରିୟାକୁ ପ୍ରଲୋଭିତ କରେ | ଭୋଲଟେଜ୍ ସେନସର ପରିବର୍ତ୍ତନଗୁଡ଼ିକ ଭୋଲଟେଜ୍-କ୍ଲାମ ଫ୍ଲୋରୋସେନ୍ସ ଦ୍ୱାରା ତଦାରଖ କରାଯାଇଥିଲା, ଏବଂ ଏହା ପୋଜିସନ୍ D171 ରେ ମ୍ୟୁଟେସନ୍ ଚୟନ କରାଯାଇଥିଲା | ଫ୍ଲୋରୋସେଣ୍ଟ୍ ସିଗ୍ନାଲ୍ ର ମୋଟେଣ୍ଟର ବିପରୀତତା ଅନୁକୂଳ ପରିବର୍ତ୍ତନର ସ୍ଥିତି ସହିତ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଷ୍ଟାଟିକ୍ ପାରସ୍ପରିକ କ୍ରିୟା ସହିତ ସମାନ ଭାବରେ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଷ୍ଟାଟିକ୍ ପାରସ୍ପରିକ ସମ୍ପର୍କ ସହିତ ସମାନତା | ଏହି ସନ୍ଧାନରେ, ଏହାର ସନ୍ଧାନ ସହିତ ଭିନ୍ନ ଅଟେ, ଖୋଲା ସ୍ଥିତିରେ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଷ୍ଟାଟିକ୍ ଭାବରେ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଷ୍ଟେଟିକ୍ ଭାବରେ ଯୋଗାଯୋଗ କରନ୍ତୁ | ଏବଂ GBTA ବାନ୍ଧିବା ସ୍ଥାନ ମଧ୍ୟରେ ମଧ୍ୟସ୍ଥି ଆଲିଶାସିଷ୍ଟିକ୍ କମ୍ପଲ୍ | ଫୁଜୱାରା ଏଟି AL25 ପ୍ରସ୍ତାବିତ ଯେ କିକପ୍ଲାସ୍ମିକ୍ କୋଇଲ ଡୋମେନରେ ଡିମର୍ ଇଣ୍ଟରଫେସ୍ ଦୁଇଟି S4 ହେଲିକ (ଚିତ୍ର 7b) ର ମଡେଲରେ କାଇଷ୍ଟାଇନ୍ କ୍ରସ୍ ଲିଙ୍କ୍ ବିଶ୍ଳେଷଣ ବିଶ୍ଳେଷଣ ଉପରେ ଆଧାରିତ | S4 ହେଲ୍ପିକ୍ସ ଏବଂ CCD.IN ର ଅନୁପସ୍ଥିତିର ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ VSD ଏବଂ କାର୍ଯ୍ୟକାରିତା ବିଶ୍ assures, hv1 ଚ୍ୟାନେଲଗୁଡ଼ିକ ପ୍ରାଥମିକ ଭାବରେ ବନ୍ଦ ଥିବା ଅବସ୍ଥାରେ ଯଥେଷ୍ଟ mepberen ାଦାୟୀ ଆବଶ୍ୟକ କରେ | ତେଣୁ ଚିହ୍ନଟ ହୋଇଥିବା S4-S4 ଇଣ୍ଟରଫେସର, ଚ୍ୟାନେଲରେ S1 ଏବଂ S2 ର ଯୋଗଦାନ ପାଇଁ ଏହା ପ୍ରମାଣ ପାଇଲା ଯେ ୱେଟରବାଇନ୍ ଇଣ୍ଟରଭେଷ୍ଟ୍ in ର ଯୋଗଦାନରେ SUMNUBET Inf ର ଯୋଗଦାନ ପାଇଁ ପ୍ରମାଣ ପାଇଲା ଯାହା ଉପରେ ଥିବାବେଳେ ଚ୍ୟାନେଲ୍ସକୁ ଓଭରବାଉଣ୍ଟିଟ୍ ଇଣ୍ଟରଭେସରେ ବିଭିନ୍ନ ସବନିଟ୍ ବିନ୍ୟାସକରଣ ଏବଂ ବନ୍ଦ ଅବସ୍ଥା, ଏକ ଧାରଣା ମୋନି ଏଟ୍ ର ଅନୁସନ୍ଧାନ ସହିତ ସମାନ | S1 ଗେଟିଂ ସମୟରେ 3 39 ଗତି କରେ | ଏଠାରେ, ଖୋଲା ଅବସ୍ଥାରେ, S1 ହେଲିକ୍ସର ଏକ୍ସିକ୍ଲିକ୍ସର ଏକ୍ସଟ୍ରିଲେଡିକ୍ ର ଏକ୍ସଟ୍ରିଲେକ୍ଟେଣ୍ଟର ଏକ୍ସଟ୍ରିଲାକ୍ଷିକର ପ୍ରାନ୍ତକୁ ସମର୍ଥନ କରିବା ପାଇଁ, S1 ହେଲିକସ୍ ବହୁତ ଦୂର ଅଟେ | ସିଧାସଳଖ ଅନୁସରଣ କରିବା ପାଇଁ ପରସ୍ପର ବ୍ୟତୀତ | ବେଆଇଥିବା ବିମାନର ବାହ୍ୟ ପ୍ରାନ୍ତରେ ଥିବା ଦୁଇଟି VSD ର 20 ° ଭ୍ରମଣକାରୀ ଘୂର୍ଣ୍ଣନ, ଦୁଇଟି S4 ହେଲିକ୍ ର ବାହ୍ୟ ପ୍ରାନ୍ତକୁ ନେଇ ଗଠିତ ଏକ S1-S1 ସଂରଚନାକୁ ଅମଳ କରାଯାଏ | ଆମର ସନ୍ଧାନଗୁଡିକ (ଚିତ୍ର 7b, ଡାହାଣ ପ୍ୟାନେଲ୍)। ଆମେ ଖୋଲା ଅବସ୍ଥାର ଚ୍ୟାନେଲ ପାଇଁ ଏହି ସଂରଚନାକୁ ସୁପାରିଶ କର | ଯଦିଓ ସିଭସପ ଏନଜାଇମ୍ ଏକ ମୋନୋମୁ ଭାବରେ କାର୍ଯ୍ୟ କରିବାକୁ ଚିନ୍ତା କରାଯାଏ, ଏହାର ବିଚ୍ଛିନ୍ନ ହୋଇଥିବା କ୍ରସଷ୍ଟାଲ୍ ଗଠନ ଏକ ଡିମରରେ ଥିବା କ୍ରସଷ୍ଟାନ ସ୍ଥିତିକୁ ଏକତ୍ର କରାଯାଇଥାଏ | ସାମଗ୍ରିକ ବିନ୍ୟାସ ଯାହା ପ୍ରସ୍ତାବଦାୟକ ସହିତ ସମାନ | HV1 (ଚିତ୍ର 7C 7C) ପାଇଁ .ିନ୍, ସିଭସପ ଡିମର୍, ସଂଲଗ୍ନ ସବନିଟ୍ ଠାରୁ ନିକଟତମ ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶ HV1 ରେ ସ୍ଥିତିର ମୂଳ ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶ HV1 ରେ ପୋଜିସନ୍ ପୋଜିସନ୍ ଅନୁରୂପ ଅଟେ | ଏବଂ ସିଭସିପ୍ ଡିମର୍ସ ପରାମର୍ଶ ଦିଅନ୍ତି ଯେ ଏହି ପ୍ରୋଟିନର VSD ଗୁଡିକ ଗୋଟିଏ ଇଣ୍ଟରାକ୍ରସ୍ତର ଏକ୍ସଟ୍ରିପେଲାର ସମାପ୍ତି ଏକ ଇଣ୍ଟରସେଲାର୍କର ପ୍ରାନ୍ତ ଅଛି | ଶୁକ୍ରାଣୁ ସେଲ୍ ଆକ୍ଟିଭେସନ୍ ରେ HV1 ର ଏକ ନୂତନ drug ଷଧ ଲକ୍ଷ୍ୟ ଏହି ଚ୍ୟାନେଲକୁ ଏକ ଆକର୍ଷଣୀୟ drug ଷଧ ଲକ୍ଷ୍ୟ କରେ, ଇସେକେମିକ୍ ଷ୍ଟ୍ରୋକ୍। ସ୍ତନ 12 କିମ୍ବା କଲୋନାଲ କର୍କଟ 13 ଥିବା ରୋଗୀ 13 କିମ୍ବା ବି-ସେଲ୍ ଫାୟର igs ଷଧଗୁଡିକୁ ଟାର୍ଗେଟ କରିବାକୁ ଚିନ୍ତା କରାଯାଇଥାଏ | ଏହା ଦ୍ ad ାରା ଛୋଟ ଅଣୁଏଚ୍ୟୁବେଲ୍ drugs କୁ ଟାର୍ଗେଣ୍ଡାଇଜଡ୍ କ୍ୟାରିଭ୍ୱେଟିଭ୍ ଭାବରେ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇପାରିବ | BV1 ସବନିଟ୍ ଖୋଲିବାକୁ, ବାନ୍ଧିବା ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ସମ୍ପର୍କକୁ ବାନ୍ଧିବା ପାଇଁ ଅଗ୍ରଣୀ, HV1 ଚ୍ୟାନେଲଗୁଡ଼ିକୁ ଟାର୍ଗେଟ୍ କରିବା ପାଇଁ ଅଧିକ ଶକ୍ତିଶାଳୀ drugs ଷଧର ବିକାଶକୁ ନେଇପାରେ | ମାନବ PC1 ର ସାଇଟ୍ ନିର୍ଦ୍ଦେଶିତ MUV1 ର ସାଇଟ ପଠନ ହୋଇଥିବା ଗୁଷାନ୍ତ hv1 ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇଥିଲା | ଗୋଟିଏ ସବନିଟ୍ ର ସି-ଟର୍ମିନାଲ୍ GGSGGSGSGGG ଲିଙ୍କ୍କୁ ଦେଇ ଦ୍ୱିତୀୟ ସବନିଟଙ୍କ ସହିତ ସଂଯୁକ୍ତ | ସମଗ୍ର କନଷ୍ଟ୍ରାର୍ଜ୍ସିଗୁଡିକ ଧାରଣ କରିଥିବା PgeMhe egmides no1 କିମ୍ବା sph1 ପ୍ରତିବନ୍ଧକଗୁଡିକ) ଏବଂ RNN Synenttheshish ସହିତ ଶତାବ୍ଦୀ ହୋଇଥିଲା | T7 mmessage mmachine ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପିଏସ୍ କିଟ୍ (ଆମ୍ବିଅନ୍) .1-3 ଦିନ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫିଓଲୋଜିକାଲ୍ ମାପରେ ଇଞ୍ଜେକ୍ସନ ଦିଆଗଲା | ଇକୋଏସାଇଟ୍ ବିଓସେନ୍ସରୁ 96 ମିମି ନାକ୍, 2 ମାମ KCL, 1.8 MM HAPLES, PH 7.2 18 ° C. । 2-ଗୁଆନିଡିନୋ-ବେନିଡିନୋ-ବେନଜିମିଡାଜୋଲ୍ [1], 2-ଗୁଆନୋ-ବେନଜାଇମୋଜ୍ [2], (5-ବୀସୋ-କୋନଜୋଲ୍ -11,3 | -ଏଥିଆଜଲ୍ -2-YL) ଗୁଆନିଡାଇନ୍) [6], ଉଷିଆ 2-ଗୁଆନିନୋ -1,3-ଥୋନିଡିନୋଟେଲ୍ [-ମର୍ଥିଡ୍ -11,3-ଥିଆଜୋଲ୍- 5-କାର୍ବକ୍ସିବାଇଟ୍ [9] ଏବଂ (2-ଗୁଆନୋଡିଆ -4 ମେଥିଲିଲ୍ -1,3-8-Thizey-5-5-yl) ethY ଏମେଟ [7] MP ବାୟୋମେଡିଡାଇନ୍ ର ଥିଲା | - (4-ଚୋରୋଫେନ୍ନେଲ୍) -1,3 - ଥିଆଜୋଲ୍ -2-YL] ଗୁଆନିଡିନ୍ [11] ଏବଂ 1- (3,4- ମ୍ୟାଟ୍ରିକ୍ସ ବ scientific ଜ୍ଞାନିକ | ଏହା ଯ ounds ନାଷୁ ବାଣିଜ୍ୟିକ ଭାବରେ ଅଧିକ ବିଶେଷତ। ସେମାନେ ଏକ 100 MM ଷ୍ଟକ୍ ସମାଧାନ ସୃଷ୍ଟି କରିବାକୁ ଶୁଖିଲା dmso ରେ ଅସନ୍ତୋଷ ପ୍ରକାଶ କରିଥିଲେ, ଯାହା ପରବର୍ତ୍ତୀ ସମୟରେ ନିମ୍ନରେ ସିନ୍ଥେସିଂ ଷ୍ଟୋରେଜ୍ 3 ଏବଂ 4 ରେ ସିନ୍ଥେସିଡ୍ ହୋଇଥିଲା | ଅତିକମରେ 99% ଶୁଦ୍ଧତା | 2-ଆମିନୋ -4 (triploroomethill) ବେନଜେଥୋଇମ୍) ବେନଜେଥାଇୟାଲ୍ ହାଇବରଚେଲରାଇଡ୍ (2.02 g 4 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ ଜୋରଦାର ଉତ୍ତେଜନା ସହିତ ରିଫ୍ଲୁକ୍ଡ୍ କରାଯାଇଥିଲା | ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ମିଶ୍ରଣକୁ 10N ପୋଲାସିୟମ୍ ହାଇଡ୍ରକ୍ସାଇଡ୍ ର ଧୀରେ ଧୀରେ ବା ଥଣ୍ଡା ଜଳ (3 × 50 ମଲ୍) ରେ ଜଳମଗ୍ନ କରାଯାଇଥିଲା ( 65 ° C) ଅନେକ ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ, ଏବଂ ତାପରେ ethyl acetate / ପେଟ୍ରୋଲିୟମରୁ ଇସୁଲ୍ ଏସିଟ୍ରୋଲିୟମ (500 ମିଗ୍ରା, 48%) ରୁ ପୁନ ry ସ୍ଥାପିତ ହୋଇଛି | Mp 221-222 ° C (ଆଲୋକ 225-226 ° C) 45; 1h NMR (500 MHz, dmso-d6): δ [ppm] = 7.25 ((D, 1 h, 4 h), 7.73 (d) (d) , 1 H, J = 8.1 NMR) .13C NMR (200 MHz, dmso-d6), δ = 114.2 (d, duh-d6), 121.7, 124.6 (q, j = 272 Hz), 126.1 (q, j = 272 Hz) = 31.6 Hz), 131.1, 155.5.HMUMS ମୂଲ୍ୟ ଥିଲା : 261.0419 | ନାଫଥୋ [1,2-d] ଥିଆଜୋଲ୍-ଅମ୍ିନ୍ (300 ମି.ଜି, 1.5 MMOL ).300 ମିଗ୍ରା (ବଡ଼ ଅତିରିକ୍ତ) ସାନିଆମାଇଡ୍ ଏବଂ 1.0 ml cust.to ହଟ୍ କମ୍ପାଉଣ୍ଡଗୁଡିକ ପ୍ରାୟ 2 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ହାଇଡ୍ରୋକ୍ଲୋରିକ୍ ​​ଏସିଡ୍ ଯୋଡି ଯାଇଥିଲା ଏବଂ ଏହି ସମୟ ମଧ୍ୟରେ ଅଧିକାଂଶ ଜଳର ତାପମାତ୍ରା ଏବଂ ଫଳାଫଳ ସ old ୍ଜିଡ୍ ସାମଗ୍ରୀକୁ ଥଣ୍ଡା କରାଯାଇଥିଲା | ଛୋଟ ଖଣ୍ଡରେ ଭାଙ୍ଗି ଯାଇଥିଲା ଏବଂ ଏକ ଫିକା ହଳଦିଆ ଆମୋରସେଫସ୍ ଦୃ solid ଯୋଗାଇବା ପାଇଁ ପାଣିରେ ଧୋଇଥିଲା | (38 ମିଗିଏ, 10%) mp 246-250 ° C; 1h NMR (500 MHz, dmso-d6, D2o): δ [ppm] = 7.59 (t, 1 h, j = 8.3 hz), 7.77 (d, 1 h , J = 8.6 Hz), 7.89 (D, 1 h, j = 8.6 hz), 8.05 (d, 1 h, j = 8.3) .13C NMR (150) | MHZ, DMSO- D6): δ = IM, 123.6, 123, 12, 99.7, 169, 13.1.HUNSTED ମୂଲ୍ୟ , ମିଳିଲା: 243.0704 | Pclapmins axolsa (ମଲିକୁଲାର ଉପକରଣ) ବ୍ୟବହାର କରି ଆକ୍ସପ୍ ନେଗୋଡା 200B ସଫ୍ଟଲିଅରିଅର୍ ଏବଂ ଏକ୍ସେକ୍ଟରେଲୁଲାର୍ ସମାଧାନ ବ୍ୟବହାର କରି ବିଭିନ୍ନ ନିର୍ମାଣର ଆଭ୍ୟନ୍ତରୀଣ ଏବଂ ବାହ୍ୟ ପ୍ୟାଚରେ ପ୍ରସ୍ଥାନର ଆଭ୍ୟନ୍ତରୀଣ ଏବଂ ବାହ୍ୟ ପ୍ୟାଚରେ ମାପ କରାଯାଇଥିଲା | ) ଇଥାନ୍ସୁଲଫ୍ୋନିକ୍ ଏସିଡ୍ (MES), 30 ମିମି ଟେଟ୍ରଥାଇଲାମିମ୍ (ଚା) ମେସିଲିଲ୍, 5 ମିମ୍ ଚା କ୍ଲୋରାଇଡ୍, 5 ମମ ଇସୁନ୍ ଗ୍ଲାଇକଲ୍, 5 ମେମ୍ ଇଥ୍ରିନ୍ ଗ୍ଲୋବ୍ (EXTA), ଏଥିରେ ଆଡଜଷ୍ଟ୍ | PH 6.0 ଚା Hydroxide ରେ, 22 ± 2 ° C ରେ ପିପିଟି ଏକ ସୁବିଧାଜନକ ପ୍ରତିରୋଧ ଅଛି, ଯାହା 1 ଖମୁସଫାଇଟ୍ 10.2 (ମୁଲଭୁଲାର ଉପକରଣଗୁଡ଼ିକ | ) ଏବଂ ମୂଳ 8.1 (ମୂଳଦା) | HV1 ଇନବାଲିଟରର ବିଭିନ୍ନ ଏକାଗ୍ରତା ଧାରଣ କରିଥିବା ସମାଧାନ ଏବଂ କେତେକ କ୍ଷେତ୍ରରେ ଏକ VC-6 ପର୍ଟର୍ ଭାଲଭ୍ ସିଷ୍ଟମ୍ ମାଧ୍ୟମରେ ମାଧ୍ୟାକର୍ଷଣ ଦ୍ୱାରା ଗାଧରରେ ପ୍ରବର୍ତ୍ତିତ ହୋଇଥିଲା (ଟ୍ରାନ୍ସିଜର- ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରେମର ତର୍କ) ସିଗ୍ନାଲ୍ ସୁପ୍ୟୁଜନ୍ ପେନ୍ସିଲ୍ (ସ୍ୱୟଂଚାଳିତ SCI) ଏକ ପ୍ୟାଚ୍ ପାଇପେଟିଟ୍ କିମ୍ବା ଶେଷରେ ଆଇସୋବୋନିଆଲ୍ ଆମ୍ପ୍ରୋମେଟ୍ରିକ୍ ମାପ ବ୍ୟବହାର କରି ଏକ ପ୍ୟାଚ୍ ପାଇପେଟି ଏକ୍ସପ୍ରେସନ୍ସ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇଥିଲା | +120 mv dv dv diplanizing Ploplanigingation Pluploorizing adse.gv ମାପଗୁଡିକ ପୂର୍ବରୁ ବର୍ଣ୍ଣିତ ହେବା ପରେ -20 ମ୍ୟାସରେଜ୍ ପଲ୍ସ କରିବା ପରେ -20 ମିଟର ପଲ୍ସ ଅଟେ | ବର୍ତ୍ତମାନର କ୍ଷୟ 18 ପାଇଁ ସଂଶୋଧନ କରିବା ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ | GV Gove boltzmann ସମୀକରଣକୁ ଫିଟ୍ କରେ ଏବଂ ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ନିର୍ଭରଶୀଳତା ନିର୍ଭରଶୀଳତା ପାଇଁ ଏକାଗ୍ରତା ନିର୍ଭରଶୀଳ ନିର୍ଭରଶୀଳତା ପାଇଁ ସ୍ଥିର କରାଯାଇଥିଲା (ଅର୍ଥାତ୍% ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ଉପରେ) ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରାଯାଇଥିଲା (ଅର୍ଥାତ୍% ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ମୂଲ୍ୟ) ପାହାଡ ସମୀକରଣ ସହିତ: ଇନହୋମିଟରର ଏକାଗ୍ରତା ମୁଁ ଏବଂ H ହେଉଛି ହିଲ୍ କୋଏଫିସିଏଣ୍ଟ୍ | ହିଲ୍ କୋଏଫିସିଏଣ୍ଟ୍ ଗଣନା କର, ସମୀକରଣ